ਪੋਰਸੀਨ ਸਰਕੋਵਾਇਰਸ ਕਿਸਮ-Ⅱ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਏਲੀਸਾ ਖੋਜ ਕਿੱਟ
ਮਾਡਲ ਨੰ: VD510E
Abbr.:PCV-Ⅱ ਐਬ ਐਲੀਸਾ
ਨਮੂਨਾ: ਸੀਰਮ
ਵਰਣਨ
ਨਿਰਧਾਰਨ
PCV-Ⅱ ਅਬ ਏਲੀਸਾ
ਨਿਯਤ ਵਰਤੋਂ:
ਪੋਰਸਾਈਨ ਸਰਕੋਵਾਇਰਸ ਕਿਸਮ-Ⅱ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ELISA ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਸੂਰ ਦੇ ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਵਿਟਰੋ ਵਿੱਚ ਖਾਸ PCV ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਦੇ ਨਿਰਧਾਰਨ ਲਈ ਹੈ। ਇਸ ਟੈਸਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸੂਰ ਫਾਰਮਾਂ ਦੇ ਪੋਰਸਾਈਨ ਸਰਕੋਵਾਇਰਸ ਕਿਸਮ-Ⅱ ਵੈਕਸੀਨ ਨਾਲ ਟੀਕਾਕਰਨ ਤੋਂ ਟੀਕਾਕਰਨ ਦਾ ਮੁਲਾਂਕਣ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਨਮੂਨਾ:ਸੀਰਮ
ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੀ ਸਮੱਗਰੀ:
ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਵਿਆਖਿਆ
ਕਦਮ 1 ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
1.1 ਘੋਲ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਧੋਵੋ
ਕੰਮ ਕਰਨ ਇਕਾਗਰਤਾ ਧੋਣ ਤਰਲ: ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ (20-25 ਡਿਗਰੀ) 'ਤੇ ਬਹਾਲ ਕਰਨਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸ ਨੂੰ ਇਕਸਾਰ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਬਰਾਬਰ ਹਿਲਾ ਦੇਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ। ਫਿਰ ਸ਼ੁੱਧ ਪਾਣੀ ਨਾਲ 20 ਵਾਰ ਸੰਘਣੇ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰੋ (ਉਦਾਹਰਣ ਵਜੋਂ, 95 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਸ਼ੁੱਧ ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ 5ml ਸੰਘਣਾ ਧੋਣ ਵਾਲਾ ਘੋਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ), ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ, ਅਤੇ ਪਤਲੇ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਨੂੰ 7 ਦਿਨਾਂ ਲਈ 2-8 ਡਿਗਰੀ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
1.2 ਨਮੂਨਾ ਦੀ ਤਿਆਰੀ
① ਪੂਰੇ ਜਾਨਵਰ ਦਾ ਖੂਨ ਲਿਆ ਗਿਆ, 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 4000rpm 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਅਤੇ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਇਕੱਠਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ। ਸੀਰਮ ਨੂੰ ਬਿਨਾਂ ਹੀਮੋਲਾਈਸਿਸ ਦੇ ਕੁਦਰਤੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੀ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
② ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 1:25 ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕਰੋ (5ul ਸੀਰਮ ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ 120ul ਨਮੂਨੇ ਵਿੱਚ ਪਤਲਾ ਕਰੋ) ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
ਨੋਟ: ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣਾਂ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।
1.3 ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸੰਯੁਕਤ ਤਿਆਰੀ
ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ 1:25 ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰੋ (120ul ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਡਾਇਲੁਐਂਟ ਵਿੱਚ 5ul ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ) ਅਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
1.4 ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
①ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਲੇਬਲ ਲਓ (ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੀ ਗਿਣਤੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਕਈ ਵਾਰ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ), ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਲੇਬਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਪਤਲੇ ਸੀਰਮ ਦਾ 100ul ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਮੂਨਿਆਂ ਲਈ ਦੋ ਖੂਹ ਸੈੱਟ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਈ ਕ੍ਰਮਵਾਰ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਲਈ ਹਰੇਕ ਨੂੰ 100ul ਜੋੜੋ। ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਢੱਕਣ ਲਈ ਸੀਲਿੰਗ ਪਲੇਟ ਫਿਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਹੌਲੀ-ਹੌਲੀ ਖੂਹ ਵਿੱਚ ਹਿਲਾਓ, ਅਤੇ 37 ਡਿਗਰੀ 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
②ਸੀਲਿੰਗ ਪਲੇਟ ਫਿਲਮ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹੋ, ਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਘੋਲ ਨੂੰ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਿਲਾਓ, ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 300µl ਕਾਰਜਸ਼ੀਲ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਧੋਣ ਵਾਲਾ ਤਰਲ ਪਾਓ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਤਰਲ ਨੂੰ ਖੂਹ ਵਿੱਚ ਸੁੱਟ ਦਿਓ। ਉਪਰੋਕਤ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ 5 ਵਾਰ ਦੁਹਰਾਓ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਸਾਫ਼ ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ 'ਤੇ ਸੁਕਾਓ।
③ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 100µl ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕਨਜੁਗੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਢੱਕੋ, ਅਤੇ 45 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 37 ਡਿਗਰੀ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
④ ਸੀਲਿੰਗ ਪਲੇਟ ਫਿਲਮ ਨੂੰ ਖੋਲ੍ਹੋ, ਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਘੋਲ ਨੂੰ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਿਲਾਓ, ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 300µl ਕੰਮ ਕਰਨ ਵਾਲੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਧੋਣ ਵਾਲੇ ਤਰਲ ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਤਰਲ ਨੂੰ ਖੂਹ ਵਿੱਚ ਸੁੱਟ ਦਿਓ। ਉਪਰੋਕਤ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ 5 ਵਾਰ ਦੁਹਰਾਓ, ਅਤੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਸਾਫ਼ ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ 'ਤੇ ਸੁਕਾਓ।
⑤ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 100µl ਸਬਸਟਰੇਟ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਪਲੇਟ ਨੂੰ ਢੱਕੋ ਅਤੇ ਰੋਸ਼ਨੀ ਤੋਂ 37 ਡਿਗਰੀ ਦੀ ਦੂਰੀ 'ਤੇ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ।
⑥ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਵਿੱਚ 50µl ਸਟਾਪ ਘੋਲ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਅਤੇ 5 ਮਿੰਟਾਂ ਦੇ ਅੰਦਰ ਨਤੀਜਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰੋ।
ਕਦਮ 2 ਨਤੀਜੇ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ
ਹਰੇਕ ਖੂਹ ਦਾ OD450 ਮੁੱਲ 96-ਵੈਲ ਮਾਈਕ੍ਰੋਪਲੇਟ ਰੀਡਰ 'ਤੇ ਪੜ੍ਹਿਆ ਗਿਆ ਸੀ।
2.1 ਪ੍ਰਮਾਣਿਕਤਾ
ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਨਿਯੰਤਰਣ ਦਾ ਔਸਤ OD450nm ਮੁੱਲ ਸੀ<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥5, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.
2.2 ਗਣਨਾ ਵਿਧੀ
ਹਰੇਕ ਨਮੂਨੇ ਲਈ, ਸਹੀ ਕੀਤੇ ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਮੁੱਲਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਅਨੁਸਾਰ S/P ਦੀ ਗਣਨਾ ਕਰੋ:
S / P=(ODਨਮੂਨਾ-ODਐਨ.ਸੀ) / (ਓ.ਡੀਪੀ.ਸੀ-ODਐਨ.ਸੀ)
2.3 ਨਤੀਜੇ ਦੀ ਵਿਆਖਿਆ
ਜਦੋਂ ਐੱਸ/ਪੀ<0.15, it is judged as negative.
ਜਦੋਂ S/P 0.25 ਤੋਂ ਵੱਧ ਜਾਂ ਬਰਾਬਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਸਨੂੰ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਮੰਨਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
ਜਦੋਂ 0.15 S/P ਤੋਂ ਘੱਟ ਜਾਂ ਬਰਾਬਰ ਹੋਵੇ<0.25, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.
ਗਰਮ ਟੈਗਸ: ਪੋਰਸੀਨ ਸਰਕੋਵਾਇਰਸ ਕਿਸਮ-ⅱ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਏਲੀਸਾ ਖੋਜ ਕਿੱਟ, ਚੀਨ ਪੋਰਸਾਈਨ ਸਰਕੋਵਾਇਰਸ ਕਿਸਮ-ⅱ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਐਲੀਸਾ ਖੋਜ ਕਿੱਟ ਸਪਲਾਇਰ, ਨਿਰਮਾਤਾ, ਫੈਕਟਰੀ
ਪਿਛਲਾ: ਕੋਈ ਜਾਣਕਾਰੀ ਨਹੀਂ
ਅਗਲਾ 2: ਪੋਰਵੇਨ ਪਾਰੋਵਾਇਰਸ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਕਿੱਟ
